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诱骗受体DcR3的基因构建、表达及特异性鉴定

诱骗受体DcR3的基因构建、表达及特异性鉴定

作     者:李文珠 陶惠然 颜江华 张长弓 苏金华 王阶平 杨桂旺 庄国洪 

作者机构:厦门大学生命科学学院福建厦门361005 厦门大学医学院抗癌研究中心福建厦门361005 

基  金:厦门大学科研启动基金资助(No.Z03103) 

出 版 物:《细胞与分子免疫学杂志》 (Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology)

年 卷 期:2006年第22卷第2期

页      码:151-153页

摘      要:目的:构建适于原核表达的人诱骗受体DcR3基因,并进行重组蛋白的表达纯化及特异性鉴定。方法:查得人DcR3cDNA全序列,将其分段设计引物,通过重叠PCR获得DcR3基因。构建pET-22b(+)/DcR3表达载体,转化大肠杆菌Rosseta-gami,IPTG诱导表达,Ni柱纯化。采用ELISA进行特异性鉴定。结果:通过重叠PCR获得了编码正确氨基酸序列的目的基因。目的蛋白以包涵体的形式表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上。纯化后,蛋白纯度达95%以上。ELISA结果表明所纯化的蛋白可与抗DcR3抗体发生特异结合。结论:诱骗受体DcR3基因的成功构建、表达及纯化,为进一步的功能研究奠定了基础。

主 题 词:DcR3 基因构建 基因表达 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:1007-8738.2006.02.006

馆 藏 号:203578256...

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