人类外周血染色体G显带的改良方法(英文)

作     者：吴子钊 程李晴 穆灵敏 陈正跃 Wu Zi-zhao;Cheng Li-qing;Mu Ling-min;Chen Zheng-yue

作者机构：新乡医学院河南省新乡市453003 

出 版 物：《中国组织工程研究与临床康复》 (Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2007年第11卷第11期

页      码：2185-2186,2193页

摘      要：背景:染色体G显带常规方法操作繁琐、费时、效果较差,不利于临床染色体病的检查和教学科研等。目的:寻找提高染色体G显带效果的方法。设计:观察性实验。单位:新乡医学院。材料:实验于2001-01/2005-01在新乡医学院形态实验室完成。取新乡医学院第三附属医院妇产科2001-2004年门诊不孕不育和不良生育史患者外周血共376份。RPMI1640培养液(GIBCO公司),20%小牛血清,秋水仙素,0.075mol/LKCl,甲醇,冰醋酸,胰蛋白酶(SIGMA公司),Giemsa染液。方法:改良的人类外周血染色体制备技术及G显带方法:操作步骤同常规方法,只是将部分影响因素做了调整,如秋水仙素作用时间调整到终止培养前2h,加入1mL固定液(甲醇∶冰醋酸=2∶1)进行预固定,混匀后以1500r/min离心10min。再离心后视细胞多少加新鲜固定液,制成细胞悬液,滴片。将上述玻片标本置500℃烤箱中一两小时,自然冷至37℃后,浸入胰蛋白酶液中消化3～5min左右,立即移入Giemsa染液(用1份Giemsa原液加9份pH为6.8的磷酸缓冲液配制)中染色10min,镜检计数,共观察3000分裂相数,计算标本的400～600条分裂相的百分率和分散良好百分率。染色体分散良好指染色体分散后没有重叠,数目完整,随体和着丝点明显,着色鲜明,形状清晰,且各色染色体处于同一平面上。分裂相百分率=400～600分裂相细胞数/观察细胞数×100%。主要观察指标:标本的400～600条分裂相百分率和分散良好百分率。结果:常规方法400～600条分裂相占52%,分散良好率68%;改良方法400～600条分裂相占75%,分散良好率86%,两组比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论:改良方法获得的染色体分裂相多,分散良好,长短适中,Giemsa染色显示带纹清晰。

主 题 词：染色体 G显带 秋水仙素 固定液 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 1007[医学-药学类] 0403[0403] 1002[医学-临床医学类] 1010[医学-医学技术类] 0703[理学-化学类] 0836[0836] 10[医学] 

D　O　I：10.3321/j.issn:1673-8225.2007.11.013

馆 藏 号：203578533...