实时荧光定量PCR技术的操作实践

作     者：杨怡姝 孙晓娜 王小利 沈思嗣 李泽琳 曾毅 YANG Yi-shu;SUN Xiao-na;WANG Xiao-li;SHEN Si-si;LI Ze-lin;ZENG Yi

作者机构：北京工业大学生命科学与生物工程学院北京100124 

基　　金：国家重点基础研究发展(973)计划项目(2009CB930202) 北京市教委科研项目(KM200810005015) 北京市自然科学基金项目(5072003) 北京工业大学校青年基金项目(X1015001201001) 

出 版 物：《实验室研究与探索》 (Research and Exploration In Laboratory)

年 卷 期：2011年第30卷第7期

页      码：15-19页

摘      要：采用Mx3000P型实时荧光定量PCR仪,以SYBRGreen I法相对定量技术为例,设计1例检测针对HIV-1 vpr基因的特异性siRNA基因沉默效果的实验。介绍了实时荧光定量PCR技术上机前样本的制备过程、检测程序及相关参数的设置方法等操作流程;结合熔解曲线、扩增曲线进行结果分析;强调了实验整体设计、引物设计与PCR反应体系的优化和内参的恰当选择在实时荧光定量PCR技术中的重要性。

主 题 词：荧光定量PCR SYBRGreenI 扩增曲线 熔解曲线 

学科分类：0401[教育学-教育学类] 04[教育学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1006-7167.2011.07.004

馆 藏 号：203580275...