鸡去泛素化相关因子1基因原核表达载体的构建及表达

作     者：赵程程 郑海南 吴山力 郑梅竹 杨德才 张玉静 艾永兴 

作者机构：吉林大学畜牧兽医学院吉林长春130062 吉林大学白求恩医学院吉林长春130021 长春师范学院中心实验室吉林长春130032 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(31272528) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2013年第33卷第1期

页      码：85-88页

摘      要：构建鸡去泛素化相关因子1(Chicken ubiquitin-related factor 1,chUAF1)的原核表达载体,并对表达产物进行鉴定。将提取的鸡法氏囊cDNA根据哺乳动物基因组的特性5′-端GC含量高3′-端GC含量低的特点设计2对引物,PCR获取2段基因片段。将两者用搭桥部分的酶切位点进行酶切,胶回收,连接成chUAF1基因全长,再将基因克隆入pMD18-T载体,酶切鉴定后,将chUAF1基因亚克隆到pET28a原核表达载体,构建重组质粒pET28a-UAF1。转化BL21(DE3)大肠杆菌中,IPTG诱导表达并鉴定。结果显示,所构建的chUAF1基因表达载体pET28a-chUAF1经PCR及DNA测序结果表明构建正确,SDS-PAGE鉴定在预期位置出现阳性条带。结果表明,已成功构建了pET28a-chUAF1原核表达载体,为下一步试验提供了依据。

主 题 词：泛素化相关因子1 构建 原核表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 090601[090601] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2013.01.006

馆 藏 号：203581011...