丙型流感病毒RNA标准品的制备和实时荧光定量-反转录聚合酶链反应检测方法的建立

作     者：蓝雨 赵翔 李晓丹 隗合江 王大燕 舒跃龙 

作者机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家流感中心世界卫生组织流感参比和研究合作中心北京102206 

基　　金：973课题"重要病毒在不同宿主中的复制机制"(No.2011CB504704)~~ 

出 版 物：《疾病监测》 (Disease Surveillance)

年 卷 期：2013年第28卷第7期

页      码：528-531页

摘      要：目的通过分析GenBank中丙型流行性感冒(流感)病毒的序列,建立丙型流感病毒实时荧光定量-反转录聚合酶链反应(rRT-PCR)检测方法,并制备丙型流感病毒的RNA标准品。方法下载GenBank中丙型流感病毒的序列,使用Beacon Designer 8软件在保守区域设计特异性引物和TaqMan荧光探针。人工合成病毒HE、NP、MP和NS基因序列,克隆到pBluescriptⅡSK(+)质粒载体,进一步通过体外转录获得RNA模板,并验证检测方法的检测极限值和特异性。结果建立了针对丙型流感病毒HE、NP、MP和NS基因的快速、可靠的实时荧光定量RT-PCR检测方法,同时制备了RNA标准品。结论本文建立的丙型流感病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法,可以在日常监测和临床鉴定中快速、准确地检测丙型流感病毒。

主 题 词：流感病毒 丙型流感病毒 实时荧光定量-反转录聚合酶链 检测 

学科分类：1001[医学-基础医学] 10[医学] 

D　O　I：10.3784/j.issn.1003-9961.2013.7.005

馆 藏 号：203581265...