应用PCR技术和wciP基因测序方法鉴定6群肺炎链球菌血清型

作     者：陈琼 陈驰 石继春 王春娥 叶强 Chen Qiong;Chen Chi;Shi Jichun;Wang Chun’ e;Ye Qiang

作者机构：中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 

基　　金：国家重大科技专项经费资助(2013ZX09304101) 

出 版 物：《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2014年第34卷第4期

页      码：315-318页

摘      要：目的：利用分子生物学方法，包括PCR技术和wciP基因测序鉴别6群肺炎链球菌血清型。方法根据GenBank上发表的wchA基因和wciO基因设计合成6群特异性引物，wciNα基因设计合成6A/B型特异性引物，wciNβ基因设计合成6C/D型特异性引物，做PCR扩增，凝胶电泳确认PCR产物；根据wciP基因设计6群特异性引物，PCR扩增后产物测序确定第584位核苷酸。结果原6A型9株菌株（编号为6A-1至6A-9）和原6B型7株菌株（编号为6B-1至6B-7）用6群特异性引物进行的扩增均有分子量在2.0 kb左右的PCR产物，而1型没有PCR产物；除6A-2、6A-3、6B-3和6B-7外，其余菌株用6A/B型特异性引物进行的扩增有600 bp左右的PCR产物；6A-2、6A-3、6B-3和6B-7用6C/D型特异性引物进行的扩增有750 bp左右的PCR产物；测序结果确认原6A型9株菌株wciP基因第584位为G，原6B型7株菌株wciP基因第584位为A。结论6A-1、6A-4、6A-5、6A-6、6A-7、6A-8、6A-9属于6A型，6A-2、6A-3属于6C型，6B-1、6B-2、6B-4、6B-5、6B-6属于6B型，6B-3和6B-7属于6D型。

主 题 词：wciNα基因 wciNβ基因 wciP基因 肺炎链球菌 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 100208[100208] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2014.04.012

馆 藏 号：203581588...