利用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应方法检测血液中伤寒沙门菌

作     者：樊粉霞 娄静 陈建才 聂艳妮 阚飙 闫梅英 FAN Fen-xia;LOU Jing;CHEN Jian-cai;NIE Yan-ni;KAN Biao;YAN Mei-ying

作者机构：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所北京昌平102206 苏州大学基础医学与生物科学学院 

基　　金：国家十二五重大专项-重大传染病应急处置检测技术平台(No.2011ZX10004-001) 

出 版 物：《疾病监测》 (Disease Surveillance)

年 卷 期：2012年第27卷第6期

页      码：471-474页

摘      要：目的建立实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(real time fluorescent quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,rRT-PCR)方法检测伤寒沙门菌。方法针对伤寒沙门菌STY1631基因设计特异性引物,通过优化反应条件,建立检测该靶基因的rRT-PCR方法,利用51个血清型的纯培养伤寒和非伤寒沙门菌菌株、常见非沙门致腹泻病原菌以及发热为主要症状的8种常见病原菌核糖核酸(RNA)评价该方法的特异性及敏感性,同时对伤寒沙门菌全血模拟标本进行敏感性检测。结果利用该方法检测48株伤寒沙门菌均阳性,其余33种非伤寒沙门菌血清型、致腹泻的其他5种肠道致病菌以及发热为主要症状的8种常见非沙门菌也均扩增阴性。在对纯菌总RNA检测中,rRT-PCR的最低检测限为1 pg/反应,即194个拷贝/反应。以全血模拟样品提取核酸为模板的检测中,敏感性达1×102cfu/ml。结论建立了敏感性高、特异性好的rRT-PCR检测血液中伤寒沙门菌的方法,为伤寒沙门菌感染的快速诊断及不明原因发热症状的病原初步鉴别提供了简便的手段,可用于对伤寒的早期诊断、预防控制及临床治疗。

主 题 词：伤寒沙门菌 实时荧光定量反转录-聚合酶链反应 检测 

学科分类：1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

D　O　I：10.3784/j.issn.1003-9961.2012.6.016

馆 藏 号：203587110...