牛肠激酶轻链基因的构建与原核表达

作     者：吕永通 李文燕 杨帆 赵小慧 胡风庆 回晶 LV Yong-tong;LI Wen-you;YANG Fan;ZHAN Xiao-hui;HU Feng-qing;HUI Jing

作者机构：辽宁大学生命科学院生物材料与生物制药实验室辽宁沈阳110036 

出 版 物：《辽宁大学学报（自然科学版）》 (Journal of Liaoning University：Natural Sciences Edition)

年 卷 期：2012年第39卷第1期

页      码：12-14页

摘      要：肠激酶作为一种丝氨酸蛋白酶,能够识别顺序-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys,水解赖氨酸C端的肽键.根据NCBI中牛肠激酶基因序列(L19663)设计18条引物,通过重叠延伸拼接PCR技术(SOE-PCR)扩增两端带有酶切位点的牛肠激酶轻链基因.构建表达载体pET32a-EK,表达载体转化*** BL21(DE3),利用IPTG诱导表达嵌合蛋白,并用离子交换柱层析纯化肠激酶,获得了高纯度的重组肠激酶轻链蛋白,为大规模生产打下了基础.

主 题 词：肠激酶 表达 纯化 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-5846.2012.01.003

馆 藏 号：203587563...