应用巢式聚合酶链反应-限制性片段长度多态技术检测乙型肝炎病毒阿德福韦耐药变异-rtN236T变异

作     者：闫杰 谢雯 王磊 冯鑫 宋淑静 王晶波 刘顺爱 魏红山 

作者机构：北京地坛医院北京100011 山东大学医学院济南市传染病医院 

基　　金：首都医学发展科研基金(No.2002-3046) 

出 版 物：《胃肠病学和肝病学杂志》 (Chinese Journal of Gastroenterology and Hepatology)

年 卷 期：2006年第15卷第3期

页      码：236-238页

摘      要：目的建立一种简便、快速、实用的乙型肝炎病毒(HBV)阿德福韦(ADV)耐药变异-rtN236T变异的快速检测方法。方法根据GenBank收录的HBV基因全序设计巢式PCR引物,使野生株(rt236N)PCR产物中含有DraⅠ酶切位点(5′TTTAAA3′),而变异株(rt236T)无此限制性酶切位点。选取4份应用ADV治疗1年以上出现HBVDNA反跳的临床耐药慢性乙型肝炎患者血清,经PCR扩增、DraⅠ酶切、3%琼脂糖凝胶电泳,进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析。并选择经该方法鉴定的野生株及变异株各1例进行HBVRT区基因序列分析。结果自4份血清标本中检测到1例rtN236T变异。所建立的ntPCR-RFLP方法灵敏度高,可以检测到103copies/L的HBVDNA;特异性强,其RFLP分析结果与DNA测序结果一致。结论应用ntPCR-RFLP方法检测rtN236T变异具有灵敏、特异、简便的优点,适用于ADV耐药变异的临床监测工作。

主 题 词：阿德福韦 乙型肝炎病毒 变异 

学科分类：1004[医学-公共卫生预防医学类] 100401[100401] 10[医学] 

馆 藏 号：203593677...