针对人caspase-8基因的siRNA的载体的构建及其沉寂效应检测

作     者：赵行宇 张巍 吕士杰 陈默然 沈楠 田晶 任旷 

作者机构：吉林医药学院生理学教研室吉林吉林132013 吉林医药学院生物化学教研室吉林吉林132013 吉林医药学院科研处吉林吉林132013 吉林医药学院实验中心吉林吉林132013 

出 版 物：《细胞与分子免疫学杂志》 (Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology)

年 卷 期：2007年第23卷第10期

页      码：967-968,972页

摘      要：目的:设计并构建针对人caspase-8基因mRNA的siRNA表达载体,观察其对转染细胞中的caspase-8的抑制作用。方法:化学合成用于产生针对caspase-8的发夹状的RNA的寡核苷酸,将合成的寡核苷酸链退火形成双链,连接入经HindIII和BglII双酶切后的pSUPER真核表达载体。对重组质粒进行酶切分析和测序鉴定。通过脂质体介导,把重组质粒瞬时转染入HeLa细胞,RT-PCR、间接免疫荧光检测其对mRNA和蛋白表达的干涉效果。结果:构建了针对人caspase-8基因的RNA干涉真核表达载体pSUPER-C1和pSU-PER-C2,并在人HeLa细胞中有效发挥了对caspase-8基因的干涉作用,而且pSUPER-C1对于caspase-8基因的抑制作用要优于pSUPER-C2。结论:成功地构建了针对人caspase-8基因的siRNA载体,转染HeLa细胞后可抑制caspase-8基因的表达。

主 题 词：caspase-8 RNA干涉 真核表达载体 HeLa细胞 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1007-8738.2007.10.027

馆 藏 号：203594031...