禽流感病毒等RNA病毒鉴别基因芯片的制备

作     者：田丽娜 王秀荣 杨忠苹 石霖 陶启蒙 包红梅 李雁冰 陈化兰 TIAN Li-na;WANG Xiu-rong;YANG Zhong-ping;SHI Lin;TAO Qi-meng;BAO Hong-mei;LI Yan-bing;CHEN Hua-lan

作者机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室 

基　　金：中俄国际合作项目(2007DFR30360) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2008年第38卷第8期

页      码：685-690页

摘      要：将克隆和鉴定的AIV的HA、NA、M、NS、NP基因以及NDV、IBDV、IBV的保守基因片段作为探针，同时以克隆的GAPDH基因作为阳性对照，利用芯片点样系统spotArray TM24将探针与阳性对照、阴性对照和空白对照按照设计好的阵列点在基片上，制备了AIV等RNA病毒诊断芯片，并从点样条件和杂交条件两个方面进行了优化。结果显示，探针浓度在300～1200μg／mL时点样，Cy3-dUTP终浓度为0．05μmol／mL，杂交温度在42℃，杂交时间在8～12h时，杂交信号比较理想。该方法对20份已鉴定的H5N1亚型禽流感病毒的检出率为100％（20／20）；10份现地送检的疑似AIV样品的检出率为70％（7／10），检测结果与RT—PCR和鸡胚传代分离鉴定的符合率为100％。结果表明，制备的DNA芯片可有效诊断上述病毒。

主 题 词：禽流感病毒 基因芯片 鉴别诊断 优化 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-4696.2008.08.009

馆 藏 号：203594297...