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HPV16E6基因特异性RNA干扰表达载体的构建及对HPV16E6基因抑制作用的研究

HPV16E6基因特异性RNA干扰表达载体的构建及对HPV16E6基因抑制作用的研究

作     者:李大可 彭芝兰 尤志学 

作者机构:南京医科大学第一附属医院妇产科江苏南京210029 四川大学华西第二医院妇科四川成都610041 

基  金:国家自然科学基金资助(30371483) 

出 版 物:《南京医科大学学报(自然科学版)》 (Journal of Nanjing Medical University(Natural Sciences))

年 卷 期:2008年第28卷第11期

页      码:1393-1397页

摘      要:目的:构建针对HPV16 E6基因的RNA干扰表达载体,并研究其对宫颈癌HPV16 E6基因的抑制作用。方法:针对HPV16 E6基因序列设计shRNA(short hairpin RNAs,shRNAs)片断,构建针对HPV16 E6基因的RNA干扰(RNA interference,RN Ai)质粒表达载体,脂质体法转染宫颈癌Caski细胞株,应用荧光定量PCR及流式细胞术检测其对HPV16 E6 mRNA及蛋白表达的影响。结果:经PCR及测序证实3种表达载体构建成功,细胞试验表明3种表达载体均抑制了HPV16 E6的mRNA及蛋白的表达,其中CaskiB细胞HPV16E6mRNA的抑制率为89.5%,蛋白抑制率达98.1%。结论:RNAi表达载体可以有效的抑制HPV16 E6基因的表达。

主 题 词:RNA干扰 人乳头状瘤样病毒 表达载体 FQ-PCR 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

馆 藏 号:203594395...

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