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应用表达载体介导siRNA抑制乳腺癌细胞MCF-7血管内皮生长因子-C基因的表达

应用表达载体介导siRNA抑制乳腺癌细胞MCF-7血管内皮生长因子-C基因的表达

作     者:孙平 刘艳丽 赵毅玲 李丽 刘执玉 SUN Ping;LIU Yan-li;ZHAO Yi-ling;LI Li;LIU Zhi-yu

作者机构:牡丹江医学院解剖教研室黑龙江牡丹江157011 山东大学医学院解剖学教研室济南250012 牡丹江医学院红旗医院超声室黑龙江牡丹江157011 牡丹江医学院生理教研室黑龙江牡丹江157011 

基  金:牡丹江医学院科研项目(B200816) 

出 版 物:《解剖学报》 (Acta Anatomica Sinica)

年 卷 期:2008年第39卷第6期

页      码:867-871页

摘      要:目的探讨表达载体介导小干扰RNA(siRNA)对人乳腺癌细胞系MCF-7血管内皮生长因子-C(VEGF-C)表达的抑制作用。方法设计合成一对编码后可形成小发夹结构针对VEGF-C基因的siRNA的DNA序列,将其连入pRNAT-U6.1/Neo质粒中,构建VEGF-CsiRNA表达载体。表达载体进行PCR及测序鉴定,并分别转染MCF-7细胞,半定量RT-PCR和免疫组织化学技术检测转染前后MCF-7细胞VEGF-C基因表达的变化。结果PCR和DNA测序证实,携带VEGF-CsiRNA表达载体构建成功,VEGF-C基因的mRNA和蛋白表达量与空质粒转染相比均明显下降(P<0.05),在mRNA水平其表达抑制率为61.8;在蛋白表达水平其表达抑制率为78.3。结论本研究构建的VEGF-CsiRNA表达载体可有效抑制MCF-7细胞VEGF-C的mRNA和蛋白表达,为进一步以VEGF-C为靶点的乳腺癌治疗实验研究奠定了基础。

主 题 词:小干扰RNA 血管内皮生长因子-C MCF-7 反转录聚合酶链式反应 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 07[理学] 1010[医学-医学技术类] 071009[071009] 09[农学] 0703[理学-化学类] 100214[100214] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:0529-1356.2008.06.018

馆 藏 号:203594439...

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