以类弹性蛋白多肽为标签纯化1,3-丙二醇氧化还原酶

作     者：葛慧华 黄志宏 王文研 张诗冉 张光亚 

作者机构：华侨大学生物工程与技术系厦门361021 

基　　金：国家自然科学基金项目(20806031) 福建省高校新世纪优秀人才支持项目(07176C02)资助~~ 

出 版 物：《应用与环境生物学报》 (Chinese Journal of Applied and Environmental Biology)

年 卷 期：2013年第19卷第4期

页      码：709-712页

摘      要：以类弹性蛋白多肽(ELPs)为标签的非色谱纯化重组蛋白显示出良好的应用前景.本文使用自行设计的新型ELPs纯化标签,以低浓度盐诱发其可逆相变,从而更温和、高效地纯化融合表达的1,3-丙二醇氧化还原酶(PDOR).在测得ELPs-PDOR融合蛋白在不同浓度Na2CO3溶液中相变温度的基础上,选取0.8 mol/L Na2CO3溶液,在室温下使ELPs发生可逆相变,与目的蛋白PDOR一同聚集,经可逆相变以离心法得以纯化,得到纯度约98%的纯酶,纯化倍数可达到8倍以上,是组氨酸标签的7倍多.融合酶的酶学性质表明ELPs作为纯化标签对目标蛋白空间结构影响微小,融合蛋白可直接作为酶催化化学反应.低盐诱发相变的方法,可避免盐浓度过高对酶结构及性能产生的不利影响,因此,在重组酶纯化上更具有优势.

主 题 词：类弹性蛋白多肽 纯化标签 可逆相变 重组酶纯化 非色谱法 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 0830[工学-生物工程类] 071010[071010] 081704[081704] 1001[医学-基础医学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 

核心收录：

D　O　I：10.3724/SP.J.1145.2013.00709

馆 藏 号：203596615...