内质网应激在D-氨基半乳糖／脂多糖诱导小鼠急性肝衰竭中的作用

作     者：任锋 杨丙章 张向颖 温韬 王欣欣 殷继明 朴正福 郑素军 张晶 陈煜 陈德喜 段钟平 

作者机构：首都医科大学附属北京佑安医院肝病研究所北京100069 首都医科大学附属北京佑安医院病理科北京100069 首都医科大学附属北京佑安医院人工肝中心北京100069 

基　　金：国家“十二五”科技重大专项(2012ZX10002004-006、2012ZX10004904-003-001、2013zX10002002-006-001) 国家自然科学基金(81270532),北京市优秀人才培养资助项目(2011D003034000022)I首都特色临床应用研究(Z121107001012167),2012年度留学回国人员择优资助项目 

出 版 物：《中华肝脏病杂志》 (Chinese Journal of Hepatology)

年 卷 期：2014年第22卷第5期

页      码：364-368页

摘      要：目的研究内质网应激在D-氨基半乳糖／脂多糖联合注射诱导小鼠急性肝衰竭致病机制中的作用。方法以C57BL／6小鼠为研究对象，腹腔注射D-氨基半乳糖／脂多糖建立小鼠急性肝衰竭模型。动物分为对照组、急性肝衰竭模型组、4-丁酸苯酯干预组（建模前6h腹腔注射）。Westemblot方法检测肝组织内质网应激标志物蛋白表达水平，检测血清ALT、AST水平评价肝脏功能，观察肝脏组织病理学变化评价肝脏损伤情况，实时荧光定量PCR检测肝细胞炎症因子如肿瘤坏死因子（TNF）α、白细胞介素（IL）-6和IL-1β基因表达情况，凋亡细胞原位末端转移酶标记试验法检测肝细胞凋亡情况。多组间均数比较采用单因素方差分析，两样本均数比较采用成组设计t检验；对于小鼠的生存分析，应用两两比较的Logrank检验。结果Westernblot方法结果显示，内质网应激蛋白标志物葡萄糖调节蛋白78和葡萄糖调节蛋白94随着急性肝衰竭的进展表达水平逐渐升高；非折叠蛋白反应蛋白1型内质网跨膜蛋白激酶1α、X盒结合蛋白1、活化转录因子6在急性肝衰竭早期被激活，而内质网应激诱导的凋亡蛋白CCAAT／增强子结合蛋白同源蛋白和caspasel2在急性肝衰竭晚期表达升高。4-丁酸苯酯抑制内质网应激可显著改善肝炎症[ALT：（1227．7±301．1）u／L与（727．5±412．5）u／L，P〈0．05；AST：（1682．9±580．2）u／L与（744．9±267．5）U／L，P〈0．051，并且抑制炎症因子的表达（TNFα：1．55±0．47与0．63±0．20，P〈0．05；IL-1β：7．39±2．03与4．51±1．44，P〈0．05；IL-6：0．43±0．14与0．18±0．03，P〈0．05）；凋亡细胞原位末端转移酶标记试验和Westemblot方法研究结果表明，4-丁酸苯酯干预内质网应激可显著抑制肝细胞凋亡，并降低了剪切型caspase3表达。结论内质网应激在D-氨基半乳糖／脂多糖诱导小鼠急性肝衰竭过程中承担着关键作用，抑制内质网应激通过降低炎症反应和肝细胞凋亡从而改善肝损伤。

主 题 词：肝功能衰竭 急性 脂多糖类 炎症 内质网应激 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1007-3418.2014.05.009

馆 藏 号：203596922...