bcr-abl基因免疫诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞杀伤功能

作     者：刘楠 孙秉中 冯琦 高杰英 罗振革 彭虹 刘永全 

作者机构：第四军医大学西京医院血液内科陕西西安710033 军事医学科学院微生物流行病学研究所免疫室北京100850 

基　　金：国家自然科学基金资助项目 (3 9770 3 3 6 ) 陕西省科研基金资助项目 (98SM40 ) 

出 版 物：《第四军医大学学报》 (Journal of the Fourth Military Medical University)

年 卷 期：2001年第22卷第16期

页      码：1478-1481页

摘      要：目的　研究 bcr- abl融合基因免疫在慢性髓系白血病(chronic myelogenous leukem ia CML )中的作用以及探讨CML 基因免疫治疗的可行性 .方法　设计两条引物扩增 bcr-abl融合位点两侧约 490 bp大小的 c DNA,经测序鉴定正确后 ,将其克隆至真核表达载体 pc DNA3.1,通过电穿孔法转染至 p815细胞 ,应用 G418筛选建立稳定的靶细胞 ,同时将重组真核表达载体肌肉免疫 BAL B/ c小鼠以获取特异的效应细胞 ,乳酸脱氢酶 (L DH)法检测特异性杀伤率 .结果　 1PCR扩增出可用于基因免疫的位于 bcr- abl融合基因位点两侧的490 bp大小的 c DNA,序列测定除第 45 2位碱基 C突变为 T外其余序列均正确 ;2构建了重组真核高效表达载体 ,命名为pc DNA/ bcr- abl;3G418梯度筛选建立了稳定表达该融合基因的细胞系 ,逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)检测到该细胞系有 bcr- abl m RNA水平的表达 ;4bcr- abl基因免疫后的小鼠能有效诱导出特异性细胞毒 T细胞 (cytotoxic T lymph-cyte,CTL) .结论　位于融合位点两侧的 bcr- abl基因肌肉免疫小鼠能够诱导特异性 CTL ,杀伤 bcr-

主 题 词：基因治疗 ABL 电穿孔 T淋巴细胞 细胞毒性 肿瘤 白血病 bcr-abl 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3321/j.issn:1000-2790.2001.16.011

馆 藏 号：203597048...