伊氏锥虫HGPRT基因cDNA的克隆及其在***中的表达

作     者：刘全 王祥生 LIU Quan,WANG Xiangsheng(The Military Veterinary Institute,Quartermaster University of PLA,Changchun 130062,China)

作者机构：解放军军需大学军事兽医研究所长春130062 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2003年第34卷第6期

页      码：597-599页

摘      要：根据引物设计的一般原则,参照伊氏锥虫HGPRT基因的核苷酸序列设计、合成一对引物,PCR扩增伊氏锥虫HGPRT基因cDNA。低熔点琼脂糖回收PCR产物,并将其克隆至pGEM-TEasy载体中,经酶切、PCR鉴定和序列分析,获得重组中间质粒pGEM/HGPRT。重组中间质粒pGEM/HGPRT经NcoⅠ和SalⅠ双酶切,回收目的片段HGPRT,以非融合形式插入原核表达质粒pBV220构建表达质粒pBV/HGPRT,转化大肠杆菌DH5α,42℃诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳和薄层扫描分析,表达产物HGPRT的分子量约为23kD,与理论推算值相符,表达率占总菌体蛋白的19%,经间接ELISA检测,表达产物能被伊氏锥虫阳性血清所识别。

主 题 词：伊氏锥虫 HGPRT基因 cDNA 克隆 E.coli 表达 核苷酸序列 PCR扩增 质粒 表达 分子量 大肠杆菌 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 090601[090601] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:0366-6964.2003.06.016

馆 藏 号：203598296...