串联MS2衣壳蛋白和MS2特异结合RNA表达载体构建及应用

作     者：蒋太峰 付汉江 刘珊珊 金英花 朱捷 李恩民 郑晓飞 JIANG Tai-feng;FU Han-jiang;LIU Shan-shan;JIN Ying-hua;ZHU Jie;LI En-min;ZHENG Xiao-fei

作者机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850 汕头大学医学院汕头515041 吉林大学生命科学学院长春130012 

基　　金：国家重大科学研究计划资助项目(2010CB912801) 国家重点基础研究发展计划(973计划)资助项目(2009CB521804) 国家自然科学基金资助项目(30873008 30870529) 北京市自然科学基金资助项目(5112029) 

出 版 物：《军事医学》 (Military Medical Sciences)

年 卷 期：2012年第36卷第8期

页      码：595-598页

摘      要：目的构建体内研究RNA-蛋白相互作用的表达载体。方法利用MS衣壳蛋白可与MS2结合位点(MS2bs)RNA特异性结合的特点,通过设计特异引物,构建pcDNA3.0-Flag-2XMS2和pcDNA3.0-12XMS2bs表达载体,以及表达MEG3非编码RNA的表达载体pcDNA3.0-MEG3V1-12XMS2bs。共转染细胞,进行RNA免疫沉淀,所得RNA进行实时定量PCR分析验证。结果成功构建了pcDNA3.0-Flag-2XMS2和pcDNA3.0-12XMS2bs表达载体,实时定量PCR结果表明,与对照相比能明显富集MEG3V1非编码RNA分子。结论成功构建了体内研究RNA-蛋白质相互作用的表达载体,为RNA-蛋白相互作用研究提供了新的技术方法。

主 题 词：MS2衣壳蛋白 RNA-蛋白相互作用 RNA结合蛋白 

学科分类：1001[医学-基础医学] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1674-9960.2012.08.011

馆 藏 号：203602712...