PCV3和PCV2双重PCR鉴别诊断方法的建立及应用

作     者：杨克礼 焦祖武 郭锐 周丹娜 段正赢 田永祥 Yang Keli;Jiao Zuwu;Guo Rui;Zhou Danna;Duan Zhengying;Tian Yongxiang

作者机构：湖北省农业科学院畜牧兽医研究所湖北武汉430064 农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室湖北武汉430064 

基　　金：国家重点研发计划(2016YFD0500703) 湖北省农业科技创新中心项目(2016-620-000-001-026) 农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室开放课题(2018ZD156) 

出 版 物：《现代畜牧兽医》 (Modern Journal of Animal Husbandry and Veterinary Medicine)

年 卷 期：2019年第3期

页      码：1-6页

摘      要：本研究根据GenBank中报道的PCV2和PCV3毒株全基因组序列,设计两对特异性引物,建立了一种多重PCR鉴别诊断方法,两种病毒的预期扩增片段分别大小分别为1 007 bp和505 bp。通过对扩增条件的优化,获得最佳的反应体系为25μL体系,最佳退火温度为56℃。该鉴别方法可以同时扩增PCV3和PCV2的特异性片段,而猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、轮状病毒(RV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪德尔塔冠状病毒的基因组及阴性对照均未扩增出任何条带。该方法对PCV3和PCV2的最低检出量均为10 ng/μL。对采自湖北省内规模化猪场的260份淋巴结样品检测。结果显示,PCV3阳性率为16.9%(44/260),PCV2阳性率为46.5%(121/260),PCV3和PCV2混合感染率为4.6%(12/260),双重PCR检测与测序分析的符合率为100%。结果表明,本研究建立了一种简便、灵敏、稳定可靠且特异性强的双重PCR鉴别诊断方法,可为临床样品中PCV3和PCV2的快速鉴别诊断及流行病学研究提供技术支持。

主 题 词：猪环病毒3型 猪圆环病毒2型 双重PCR 鉴别诊断 流行病学 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203607151...