干扰lnc4351对牛骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化的影响

作     者：张俊星 朱菲菲 李燕 陈明明 刘新峰 郭宏 丁向彬 ZHANG Junxing;ZHU Feifei;LI Yan;CHEN Mingming;LIU Xinfeng;GUO Hong;DING Xiangbin

作者机构：天津农学院动物科学与动物医学学院天津300384 

基　　金：天津市高校"中青年骨干创新人才培养计划"人选项目(J01009030710) 

出 版 物：《中国畜牧兽医》 (China Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2019年第46卷第3期

页      码：747-755页

摘      要：为探究长链非编码RNA(lncRNA)对牛骨骼肌卫星细胞增殖及分化的影响,本研究以牛骨骼肌卫星细胞及已建立的体外成肌诱导分化模型为基础,以前期高通量测序获得的牛骨骼肌卫星细胞分化前后表达差异倍数较大的一个预测lncRNA为靶标,对其进行生物信息学分析及亚细胞定位,命名为lnc4351。设计合成lnc4351的siRNA,转染牛骨骼肌卫星细胞,采用EdU染色的方法检测干扰lnc4351对细胞增殖的影响;对转染siRNA的牛骨骼肌卫星细胞进行体外成肌诱导分化,观察肌管的形成状态,同时采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测分化标志因子MyoG和MHC基因的mRNA及蛋白水平的表达变化,研究干扰lnc4351对细胞分化的影响。结果显示,lnc4351位于牛的14号染色体,不具有蛋白编码潜能,是一个未报道过的lncRNA,在牛骨骼肌卫星细胞的细胞质和细胞核内均有分布,主要存在于细胞核;干扰lnc4351表达后,EdU阳性细胞比率显著下降(P<0.05),说明下调lnc4351表达显著抑制了牛骨骼肌卫星细胞的增殖;下调lnc4351表达后肌卫星细胞经诱导分化产生的肌管量呈现增多趋势,分化标志因子MyoG和MHC的蛋白水平显著或极显著上调(P<0.05;P<0.01),说明干扰lnc4351能够促进牛骨骼肌卫星细胞的成肌分化过程。本研究结果表明,干扰lnc4351表达可以抑制牛骨骼肌卫星细胞的增殖并促进其成肌分化过程,为进一步开展lncRNA对牛骨骼肌发育的调控机制及肌肉发育相关研究提供参考。

主 题 词：lncRNA 牛 骨骼肌卫星细胞 细胞增殖 成肌分化 

学科分类：08[工学] 0905[农学-林学类] 09[农学] 0836[0836] 090501[090501] 

D　O　I：10.16431/j.cnki.1671-7236.2019.03.013

馆 藏 号：203607223...