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建兰花叶病毒RT-LAMP检测方法的建立

建兰花叶病毒RT-LAMP检测方法的建立

作     者:樊荣辉 黄敏玲 钟淮钦 罗远华 叶秀仙 FAN Ronghui;HUANG Minling;ZHONG Huaiqin;LUO Yuanhua;YE Xiuxian

作者机构:福建省农业科学院作物研究所福建福州350013 福建省农业科学院花卉研究中心福建福州350013 福建省特色花卉工程技术研究中心福建福州350013 

基  金:福建省公益类科研院所基本科研专项(No.2017R1026-8) 福建省农业科学院科技创新团队项目(No.STIT2017-2-9) 福建省农业科学院生产性工程化实验室中试基金项目(No.AG2017-2) 

出 版 物:《热带作物学报》 (Chinese Journal of Tropical Crops)

年 卷 期:2019年第40卷第3期

页      码:541-545页

摘      要:建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CyMV)是侵染兰花的主要病毒,严重影响其观赏价值,建立快速、灵敏的检测方法显得尤为重要。根据CyMV的外壳蛋白基因序列设计4对特异性引物,经过优化反应条件,建立该病毒的RT-LAMP检测方法,并进行LAMP检测的特异性、敏感性检测。该方法能特异扩增CyMV,与其他4种病毒(齿兰环斑病毒、菜豆黄花叶病毒、黄瓜花叶病毒和小苍兰花叶病毒)不发生反应;灵敏度为RT-PCR的10倍。田间检测20份样品中,RT-LAMP和RT-PCR检测结果一致,检出率为60%。在产物中加入荧光染料SYBR GreenⅠ,直接用肉眼观察就可判断样品是否感染CyMV,可省去电泳分析的时间。针对CyMV建立的RT-LAMP方法具有特异性强、灵敏度高、操作简单、快速等特点,适用于在进境检疫及种苗繁育过程中的检测鉴定。

主 题 词:建兰花叶病毒 RT-LAMP 检测 

学科分类:09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 090402[090402] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1000-2561.2019.03.018

馆 藏 号:203607387...

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