靶向ROR1的嵌合抗原受体修饰T细胞的构建及对ROR1阳性肿瘤细胞的杀伤作用

作     者：陈玥 莫泽明 秦笛源 郭福春 廖雪莲 胡敏 陈倩 王永生 CHEN Yue;MO Ze-ming;QIN Di-yuan;GUO Fu-chun;LIAO Xue-lian;HU Min;CHEN Qian;WANG Yong-sheng

作者机构：四川大学华西医院肿瘤中心生物治疗国家重点实验室成都610041 重庆医科大学乳腺外科重庆400016 

基　　金：国家自然科学基金(No.81673001)资助 

出 版 物：《四川大学学报（医学版）》 (Journal of Sichuan University(Medical Sciences))

年 卷 期：2019年第50卷第2期

页      码：145-151页

摘      要：目的探讨靶向Ⅰ型受体酪氨酸激酶样孤儿受体(ROR1)的嵌合抗原受体修饰的T细胞(chimeric antigen receptor T cell, CAR-T)治疗ROR1阳性肿瘤细胞的体外杀伤作用。方法设计并合成CAR基因,通过慢病毒载体质粒pWPXLd,构建靶向ROR1的CAR-T核心质粒,采用BamHⅠ/EcoRⅠ双酶切鉴定,应用流式细胞术检测多种实体瘤癌细胞株表面ROR1的表达,并采用流式细胞术、乳酸脱氢酶(LDH)检测试验检测CAR-T对ROR1阳性肿瘤细胞的杀伤作用,ELISA检测试剂盒测定培养细胞上清中γ-干扰素(IFN-γ)含量。结果构建的CAR-T质粒双酶切鉴定有CAR基因插入,流式细胞术检测结果显示CAR-T感染效率约为47.23%。多种肿瘤细胞不同程度表达ROR1。流式细胞术、LDH检测试验结果提示CAR-T能特异性地杀伤ROR1阳性肿瘤细胞。CAR-T针对ROR1阳性靶细胞能释放更多的IFN-γ(P<0.05)。结论成功构建靶向ROR1的CAR-T,并能特异地杀伤ROR1阳性肿瘤细胞,释放大量IFN-γ,为临床应用提供了实验基础。

主 题 词：CAR-T ROR1 免疫治疗 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13464/j.scuxbyxb.2019.02.001

馆 藏 号：203607454...