人心肌肌钙蛋白I第2和第4个密码子同义突变对其在大肠埃希菌中表达的影响

作     者：刘红梅 罗德生 屈伸 王宇哲 

作者机构：咸宁学院医学院生物化学与分子生物学教研室湖北咸宁437100 华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系 

出 版 物：《解放军医学杂志》 (Medical Journal of Chinese People's Liberation Army)

年 卷 期：2006年第31卷第9期

页      码：866-868页

摘      要：目的对人心肌肌钙蛋白I(cTnI)基因实行定点突变并进行原核表达,观察此突变对cTnI表达量的影响。方法利用RT-PCR方法从人心肌细胞的总RNA中克隆出编码人心肌肌钙蛋白Ⅰ的cDNA片段,设计引物将其第2和第4个密码子突变后插入原核表达载体形成重组体,并导入宿主菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,Ni-NTA树脂纯化后行Westernblot鉴定,观察突变对cTnI表达的影响。结果突变后的cTnI基因与对照组相比在大肠埃希菌中得到高效表达,经纯化可获得电泳单点纯的cTnI蛋白。结论成功克隆了cTnI基因,所设计的同义突变可促进cTnl在大肠埃希菌中的高效表达。

主 题 词：肌钙蛋白I 点突变 基因表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071007[071007] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:0577-7402.2006.09.009

馆 藏 号：203609153...