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马铃薯SSR-PCR反应体系的建立和优化

马铃薯SSR-PCR反应体系的建立和优化

作     者:张凤军 张永成 ZHANG Feng-jun;ZHANG Yong-cheng

作者机构:青海省农林科学院青海西宁810016 青海省马铃薯育种重点实验室青海西宁810016 

基  金:青海省"十一五"重大科技攻关项目:马铃薯新品种选育(2006-N-129) 国家科技支撑计划项目:高产优质专用马铃薯育种技术研究及新品种选育(2006BAD01A06-1-10) 国家马铃薯产业技术体系西宁试验站资助基金(zhsyz-27) 

出 版 物:《种子》 (Seed)

年 卷 期:2011年第30卷第1期

页      码:8-10页

摘      要:应用L16(45)正交设计对影响马铃薯SSR-PCR的主要参数进行优化,建立适于马铃薯SSR-PCR反应的最佳体系。结果表明:各因素不同水平浓度对PCR反应结果均有显著影响。马铃薯SSR-PCR优化反应体系为:10×PCR Buffer 1.0μl、模板DNA约30 ng、dNTP 200 mol/L、SSR引物66 ng、Taq DNA聚合酶0.25 U、Mg2+2.25 mmol/L,加ddH2O至终体积10.0μl。PCR扩增程序如下:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,53℃复性1 min,72℃延伸1.5 min,共35个循环;72℃延伸10 min,然后4℃保存。

主 题 词:马铃薯 正交设计 SSR-PCR 体系优化 

学科分类:09[农学] 0901[农学-植物生产类] 

D O I:10.3969/j.issn.1001-4705.2011.01.003

馆 藏 号:203610798...

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