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RNA干扰靶向抑制PIK3CB基因表达对结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响

RNA干扰靶向抑制PIK3CB基因表达对结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响

作     者:倪丽 宋于刚 NI Li;SONG Yu-gang

作者机构:南方医科大学南方医院消化科广东省胃肠疾病重点实验室广州510515 

基  金:广东省211工程重点学科建设专项基金(编号:C1030379) 

出 版 物:《肿瘤》 (Tumor)

年 卷 期:2011年第31卷第1期

页      码:22-27页

摘      要:目的:探讨RNA干扰靶向抑制PIK3CB基因(编码PI3Kp110β蛋白)的表达对结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响。方法:设计3条针对PIK3CB基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)片段及1条阴性对照siRNA,分别瞬时转染结肠癌HCT116细胞。用Real time PCR及Western印迹法筛选出1条抑制效率最高的PIK3CB-siRNA序列,然后进行CCK-8细胞增殖实验,并采用JC-1染色法检测线粒体膜电位(Δψm)的变化。结果:经转染PIK3CB-siRNA-179序列的HCT116细胞中PI3Kp110βmRNA及蛋白表达降低最为明显,抑制率达80%,选择该条siRNA作为有效干扰组进行后续实验。CCK-8细胞增殖实验显示,瞬时转染24、48及72h后,PIK3CB-siRNA-179组细胞的相对存活率较阴性对照组细胞明显降低,其中以24h及48h降低最为明显(P<0.05)。JC-1染色结果显示,瞬时转染48h后PIK3CB-siRNA-179组细胞的线粒体膜电位较阴性对照组细胞明显降低。结论:抑制PI3Kp110β蛋白表达可降低结肠癌HCT116细胞的增殖速度,诱导细胞的凋亡,推测PIK3CB基因可能成为结肠癌基因治疗的一个新靶点。

主 题 词:结直肠肿瘤 1-磷脂酰肌醇-3激酶, p110 β亚单位 RNA干扰 细胞增殖 细胞凋亡 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3781/j.issn.1000-7431.2011.01.005

馆 藏 号:203610831...

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