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快速鉴定诺卡菌的多重聚合酶链反应的建立

快速鉴定诺卡菌的多重聚合酶链反应的建立

作     者:孙渭歌 侯雪新 徐帅 孙丽娜 赵利利 张景山 杨海燕 李振军 SUN Wei-Ge;HOU Xue-Xin;XU Shuai;SUN Li-Na;ZHAO Li-Li;ZHANG Jing-Shan;YANG Hai-Yan;LI Zhen-Jun

作者机构:郑州大学公共卫生学院流行病学教研室郑州450001 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京102206 西藏民族学院西安712082 

基  金:"十二五"国家科技重大专项(2012ZX10004401 2013ZX10004221 2013ZX10004218) 公益性卫生行业科研专项(201302006) 

出 版 物:《微生物与感染》 (Journal of Microbes and Infections)

年 卷 期:2014年第9卷第2期

页      码:107-111页

摘      要:为快速准确鉴定诺卡菌,首先设计针对诺卡菌rpoB、secA1、16S rRNA基因的引物,利用单重聚合酶链反应(PCR)和测序验证引物的特异度,建立多重PCR鉴定系统,在同一反应体系和条件下对44株诺卡菌标准株、44株临床分离株和7株对照株进行扩增。结果显示,利用单对引物对其中2株诺卡菌(标准株DSM43003、临床株CDC 51)进行扩增,出现的条带均为与目的片段长度一致的单一条带,经测序并经基本局部比对搜索工具(BLAST)验证扩增片段为目的基因。建立的多重PCR结果显示,44株诺卡菌标准株中有43株(97.7%)、44株临床分离株中有42株(95.5%)rpoB、secA1、16S rRNA这3条片段均显示,7株对照株均未显示条带。结果提示,本研究建立的多重PCR简单、快速、灵敏度高、特异度好,适用于诺卡菌的快速鉴定。

主 题 词:诺卡菌 多重聚合酶链反应 鉴定 

学科分类:1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

馆 藏 号:203612346...

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