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高山被孢霉Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆、结构分析及其功能的研究

高山被孢霉Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆、结构分析及其功能的研究

作     者:李明春 刘莉 胡国武 邢来君 Li Mingchun Liu Li Hu Guowu Xing Laijun  (Department of Microbiology, Nankai University,Tianjin 300071,China)

作者机构:南开大学微生物系天津300071 

基  金:国家自然科学基金 (3 9870 0 2 0 ) 教育部高等学校骨干教师资助计划项目~~ 

出 版 物:《微生物学报》 (Acta Microbiologica Sinica)

年 卷 期:2003年第43卷第2期

页      码:220-227页

摘      要:从高山被孢霉ATCC1 62 66总DNA中扩增出大小为 1 374bp和 1 947bp的两条特异片段 ,序列分析表明后者在细胞色素b5和组氨酸Ⅰ之间含有一大小为 5 73bp的内含子和两条分别为 1 97bp和 82 8bp的外显子。推导的氨基酸二级结构分析表明 ,该基因有两个长的跨膜疏水区和 3个组氨酸保守区。分别根据D6D内含子及组氨酸Ⅱ区、Ⅲ区的序列设计引物 ,制备不同的探针与高山被孢霉的基因组杂交 ,证明在其基因组中确实存在两个Δ6 脂肪酸脱氢酶基因 ,其中一个基因含有内含子。把不含有内含子的核基因MAGL6 1克隆到的酿酒酵母表达载体pYES2 0中 ,转化到酿酒酵母INVSc1中。对筛选得到的酵母工程菌株进行脂肪酸GC分析 ,检测到了γ 亚麻酸 ,说明克隆的D6D基因MAGL6 1能在酿酒酵母中进行功能性表达。

主 题 词:高山被孢霉 △^6-脂肪酸脱氢酶基因 基因组 内含子 功能 克隆 结构 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:0001-6209.2003.02.012

馆 藏 号:203613546...

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