蝎形引物PCR快速检测环境水样中沙门菌方法研究

作     者：谢晓东 蒋蓉芳 宋伟民 

作者机构：复旦大学公共卫生学院环境卫生教研室上海200032 

出 版 物：《环境与职业医学》 (Journal of Environmental and Occupational Medicine)

年 卷 期：2003年第20卷第2期

页      码：115-119页

摘      要：[目的 ]以蝎形引物PCR技术为基础建立一套环境水样沙门菌的快速检测方法。 [方法 ]选择沙门菌himA基因设计出以荧光素 (FAM)和淬灭物 (DABCYL)双标记探针的茎环尾状结构构成蝎形引物 ,对 8种沙门菌和 8种非沙门菌经增菌、DNA提取后 ,以蝎形引物PCR方法进行检测 ,探讨该检测方法的可行性、特异性和灵敏度 ,并与普通引物PCR法检测 50份环境水样进行比较。 [结果 ]蝎形引物PCR方法检测沙门菌 ,细菌密度与荧光相对强度存在着量比关系 ,与普通引物PCR法比较 ,具有快速、特异、灵敏度高的特点 ,在 50 μlPCR反应体系中最低可检出 2cfu沙门菌。[结论 ]沙门菌蝎形引物在PCR扩增中 ,探针可特异地与目的DNA片段杂交 ,使DABCYL不能有效地淬灭FAM产生的荧光 ,荧光可经仪器直读检出。

主 题 词：蝎形引物 PCR 检测 水 沙门菌 急性 慢性 胃肠疾病 人畜共患病原菌 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1006-3617.2003.02.014

馆 藏 号：203613556...