H5N1和H9N2亚型禽流感病毒HA基因的原核表达

作     者：黄文科 林宝珍 罗琴芳 牛学锋 郭霄峰 HUANG Wen-ke;LING Bao-zhen;LUO Qing-fang;NIU Xue-feng;GUO Xiao-feng

作者机构：华南农业大学兽医学院广东广州510642 

基　　金：国家自然科学基金(30270987 30440010) 广东省自然科基金(020996) 

出 版 物：《华南农业大学学报》 (Journal of South China Agricultural University)

年 卷 期：2008年第29卷第2期

页      码：90-93,98页

摘      要：采用自行设计的引物，通过PCR的方法，分别从pMD-HA5和pMD-HA9中成功扩增出AIV0025（H5N1）株和KMⅢ（H9N2）株的血凝素（hemagglutinin，HA）基因，然后分别亚克隆到pET-32a（＋）、pET-28a（＋）表达载体中，构建并筛选出阳性重组子，分别标记为pET32-HA5、pET28-HA9．将阳性重组质粒转化进BL21（DE3）宿主菌中，通过改变IPTG浓度和诱导时间，使重组蛋白获得表达，并确定了最佳诱导条件为IPTG终浓度1．0mmol／L、诱导时间4—5h．经SDS，PAGE和Western，blotting分析表明，重组蛋白相对分子质量约为85000和63000，主要存在于包涵体中，具有良好的免疫学活性．

主 题 词：禽流感病毒 HA基因 基因克隆 原核表达 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1001-411X.2008.02.022

馆 藏 号：203617858...