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堆型艾美耳球虫乳酸脱氢酶基因的克隆与表达

堆型艾美耳球虫乳酸脱氢酶基因的克隆与表达

作     者:宋鸿雁 严若峰 徐立新 宋小凯 李祥瑞 SONG Hong-yan;YAN Ruo-feng;XU Li-xin;SONG Xiao-kai;LI Xiang-rui

作者机构:南京农业大学动物医学院江苏南京210095 

基  金:国家863计划项目(2006AA10A207) 

出 版 物:《南京农业大学学报》 (Journal of Nanjing Agricultural University)

年 卷 期:2010年第33卷第4期

页      码:109-113页

摘      要:克隆了堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)乳酸脱氢酶(LDH)基因(EaLDH),并在大肠杆菌中成功表达出重组蛋白。根据GenBank中收录的EaLDH核苷酸序列设计特异性引物,以其第一代裂殖体总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增获得EaLDH基因。将EaLDH基因片段与原核表达载体pET28a(+)连接,构建重组表达质粒pET28a(+)-LDH,并在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。结果表明,扩增出的EaLDH基因含993bp的开放阅读框,与GenBank中收录的EaLDH基因序列相似性为98%。诱导后,重组蛋白能够在大肠杆菌中高效表达,融合蛋白相对分子质量约为4.1×104。

主 题 词:堆型艾美耳球虫 乳酸脱氢酶 克隆 表达 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录:

馆 藏 号:203618541...

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