禽流感病毒分型基因芯片的研制

作     者：韩雪清 林祥梅 侯义宏 吴绍强 刘建 梅琳 贾广乐 杨泽晓 Xueqing Han;Xiangmei Lin;Yihong Hou;Shaoqiang Wu;Jian Liu;Lin Mei;Guangle Jia;Zexiao Yang

作者机构：中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所北京100029 荆楚理工学院生物工程系荆门448000 

基　　金：国家科技攻关计划项目(2004BA519A56-05)~~ 

出 版 物：《微生物学报》 (Acta Microbiologica Sinica)

年 卷 期：2008年第48卷第9期

页      码：1241-1249页

摘      要：【目的】禽流感病毒是一种全球重要的人和动物呼吸道病病原,快速确定其不同亚型对于全球流感监测具有重要的意义。本研究意在研制一种可同时鉴定禽流感病毒所有亚型的方法。【方法】根据GenBank上已发表的禽流感病毒不同亚型(16个HA亚型和9个NA亚型)的基因序列,设计合成了25对特异性引物和1对通用引物,然后以各亚型病毒的参考株RNA作为模板,建立扩增不同亚型的多重RT-PCR方法。参考各亚型病毒靶cDNAs区域的保守序列设计了52条亚型特异的探针,进而利用扩增的各亚型病毒的靶cDNAs对其特异性进行评价。在此基础上,将设计好的探针点制到处理好的玻片上,制备了禽流感病毒分型鉴定基因芯片,结合所建立的扩增不同亚型的多重RT-PCR方法,开发了禽流感病毒亚型鉴定基因芯片试剂。利用收集自49个地区的2653份标本对其特异性和敏感性进行了初步评价。【结果】用于评价的各亚型参考毒株均出现良好的特异性杂交信号,检测的敏感度可达2.47PFU/mL或2.5ng靶DNA片段,而且与禽类常见的IBV、NDV等6种病毒均无交叉反应。【结论】证明该病毒分型基因芯片具有良好的特异性、敏感性。

主 题 词：禽流感病毒 分型 基因芯片 杂交 检测 

学科分类：090601[090601] 1002[医学-临床医学类] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:0001-6209.2008.09.018

馆 藏 号：203619209...