外环境样本中产毒型O1群霍乱弧菌双重荧光定量PCR快速检测方法的建立

作     者：黄世旺 徐丹戈 徐昌平 张政 方叶珍 包芳珍 李剑 蒋雪凤 卢亦愚 HUANG Shi-wang;XU Dan-ge;XU Chang-ping;ZHANG Zheng;FANG Ye-zhen;BAO Fang-zhen;LI Jian;JIANG Xue-feng;LU Yi-yu

作者机构：杭州市江干区疾病预防控制中心杭州310004 浙江省疾病预防控制中心杭州310051 

基　　金：杭州市医药卫生科技计划项目(No.2006B079) 

出 版 物：《中国人兽共患病学报》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期：2011年第27卷第1期

页      码：29-32,36页

摘      要：目的研究建立双重荧光定量PCR技术快速检测产毒型O1群霍乱弧菌,并首次应用于外环境样本的检测中。方法从GenBank上下载O1群霍乱弧菌O抗原编码基因rfbO1和毒力基因CT序列,在rfbO1和CT保守区域设计特异性引物和探针,建立优化单一和双重荧光PCR反应体系,评价所建双重PCR反应体系的特异性、敏感性和稳定性,并应用于外环境样本的监测检验中。结果该方法对O1群霍乱弧菌检测具有高度特异性,对rfbO1和CT基因序列检出限达到1.0×102cfu/mL,构建的体系定量标准曲线相关系数分别为0.999和0.998,具有较好的稳定性,并首次从352件外环境样本中检测出了5株产毒型O1群霍乱弧菌。结论本研究建立的双重荧光定量PCR方法特异、灵敏、快速,可应用于外环境样本中产毒型O1群霍乱弧菌的大范围筛查。

主 题 词：霍乱弧菌 双重荧光定量PCR 外环境 CT rfbO1 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1002-2694.2011.01.007

馆 藏 号：203620022...