PRS—CTGF—siRNA对TGF—β1诱导的人腹膜间皮细胞细胞外基质及VEGF表达的影响

作     者：肖力 刘伏友 彭佑铭 段绍斌 刘虹 刘映红 凌光辉 XIAO Li;LIU Fu-you;PENG You-ming;DUAN Shao-Bin;LIU Hong;LIU Ying-hong;LING Guang-hui

作者机构：中南大学湘雅二医院肾内科中南大学肾脏病研究所长沙410011 

基　　金：国家自然科学基金(30370811) 

出 版 物：《中华肾脏病杂志》 (Chinese Journal of Nephrology)

年 卷 期：2008年第24卷第8期

页      码：575-580页

摘      要：目的观察pRetw—Super（PRS）反转录病毒载体介导的表达人结缔组织生长因子（CTGF）小分子干扰RNA（siRNA）对体外培养的人腹膜间皮细胞（HPMC）细胞外基质和血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法根据siRNA靶序列要求及PRS反转录病毒载体特点分别设计4对寡核苷酸，构建表达人CTGF基因siRNA的PRS—CTGF—siRNA1-4重组反转录病毒载体。以脂质体2000将重组反转录病毒载体转染PT67包装细胞，继而感染HPMC。采用RT—PCR法检测mRNA表达及Western印迹法检测蛋白质表达。结果5μg／L外源性转化生长因子β1（TGF—β1）刺激可诱导HPMC表达CTGF、纤连蛋白（FN）、Ⅰ型胶原（ColⅠ）、层粘连蛋白（LN）和VEGF明显增高；而PRS—CTGF—siRNA 1～4组与TGF—β1刺激组比较，HPMC细胞内CTGF、FN、ColⅠ、LNmRNA和蛋白表达和VEGF mRNA表达明显较低（P〈0．01），各干扰组对CTGF mRNA抑制率分别为69．3％、22．2％、27．4％和38-8％，其中以PRS-CTGF—siRNA 1组最为明显；同时PRS-CTGF-siRNA 1组相对于TGF—β1刺激组，VEGF蛋白表达也明显较低（P〈0．01）；而PRS空载体组与TGF-β1刺激组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论PRS—CTGF—siRNA重组反转录病毒载体可明显抑制TGF-β1诱导的细胞外基质及VEGF表达的增加。

主 题 词：RNA 小分子干扰 转化生长因子β 血管内皮生长因子类 结缔组织生长因子 腹膜间皮细胞 

学科分类：1001[医学-基础医学] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1001-7097.2008.08.018

馆 藏 号：203625149...