昆虫神经毒素LqhIT2的表达、抗血清制备及活性分析

作     者：李洪波 夏玉先 Hongbo Li;Yuxian Xia

作者机构：重庆大学生物工程学院基因工程研究中心重庆400030 重庆市杀虫真菌工程技术研究中心重庆400030 

基　　金：国家高技术研究发展计划项目(“863计划”)(No.2006AA10A212)资助~~ 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2008年第24卷第10期

页      码：1761-1767页

摘      要：根据毕赤酵母密码子偏爱性,不改变毒素蛋白质一级结构,设计合成了昆虫神经毒素LqhIT2基因,并分别克隆至大肠杆菌融合表达载体pPET30-a(+)和毕赤酵母分泌表达载体pPIC9K。在IPTG的诱导下,神经毒素在大肠杆菌中融合表达,表达产物经镍亲和层析纯化后,用于免疫BALB/c小鼠,制备了特异性较高的抗血清,抗体滴度超过1:128 000。利用制备的抗血清,采用斑点杂交,筛选得到了较高水平分泌表达重组LqhIT2的酵母转化子,摇摇摇摇下,毒素表达量约9 mg/L。大肠杆菌表达产物没有生物活性,酵母表达产物经注射蝗虫表现出杀虫活性。

主 题 词：昆虫神经毒素 LqhIT2 抗血清 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 1001[医学-基础医学] 09[农学] 0904[农学-动物医学类] 0836[0836] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1000-3061.2008.10.013

馆 藏 号：203625186...