牛乳铁蛋白素基因及其突变基因在大肠埃希菌中的融合表达

作     者：吴建军 闵现华 岳嘉 刘喜平 韩跃武 Wu Jian-jun;MIN Xian-hua;YUE Jia;LIu Xi-ping;HAN Yue-wu

作者机构：甘肃中医学院基础课部甘肃兰州730000 兰州大学基础医学院甘肃兰州730000 

基　　金：甘肃省科技攻关项目(2GS064-A43-020-21) 

出 版 物：《兰州大学学报（医学版）》 (Journal of Lanzhou University（Medical Sciences）)

年 卷 期：2010年第36卷第1期

页      码：44-48页

摘      要：目的构建牛乳铁蛋白素基因(LfcinB)及牛乳铁蛋白素突变基因(mLfcinB)的表达载体,建立在大肠埃希菌中融合表达的方法。方法依据大肠埃希菌偏爱密码子设计LfcinB和mLfcinB,进行克隆扩增并测序,构建LfcinB和mLfcinB的融合表达载体并转化入大肠埃希菌,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,产物经谷胱甘肽-琼脂糖凝胶法纯化。结果成功构建了融合表达载体pGEX-4T-1-LfcinB和pGEX-4T-1-mLfcinB,表达载体转化大肠埃希菌BL21,经IPTG诱导3 h后LfcinB和mLfcinB融合蛋白表达率约为30%,洗脱纯化后产物约为60%。聚丙烯酰氨凝胶电泳显示融合蛋白为29 kDa,主要以包涵体形式存在,谷胱甘肽-琼脂糖凝胶纯化后得到3.1 kDa的目的蛋白。结论LfcinB及其突变基因在大肠埃希菌中的融合表达可提高LfcinB的表达率。

主 题 词：牛乳铁蛋白素基因 牛乳铁蛋白素突变基因 融合表达 大肠埃希菌 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 071010[071010] 081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-2812.2010.01.012

馆 藏 号：203625826...