尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列抗原位点分析及免疫保护效果观察

作     者：张志晓 杨彦 叶锋平 范泉水 李东江 张希 符云新 郑颖 

作者机构：云南大学生物资源保护与利用重点实验室昆明650091 成都军区疾病预防控制中心军事医学研究所昆明650032 成都军区疾病预防控制中心博士后科研工作站昆明650032 云南农业大学农学与生物技术学院昆明650201 云南大学现代生物学研究中心昆明650091 中国协和医科大学医学生物学研究所昆明650118 

基　　金：中国博士后科学基金(20080440214)~~ 

出 版 物：《第二军医大学学报》 (Academic Journal of Second Military Medical University)

年 卷 期：2010年第31卷第4期

页      码：364-368页

摘      要：目的采用生物信息学方法分析尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列的关键抗原位点,并观察根据这些位点设计合成的新型免疫原的免疫保护效果。方法扩增尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列,采用Jameson-Wolf方法和ClustalX软件结合的生物信息学方法分析其抗原位点,人工合成筛选的抗原位点序列,并连接到pIRESneo表达载体,3次(0、2、4周)对BALB/c小鼠进行核酸免疫,ELISA法测定免疫后机体抗体水平,出血中和实验和攻毒实验初步观察其免疫保护效果。结果生物信息学方法分析得到6个关键抗原位点(MPA-1～MPA-6);ELISA法检测抗血清结果表明,抗原位点序列诱导小鼠产生的抗血清相对未免疫的小鼠血清稀释100倍后仍能表现出阳性结果;出血中和实验和攻毒实验表明,将抗原位点序列免疫小鼠可以诱导机体产生免疫反应,使体内产生抗体,能有效中和蛇毒,从而对尖吻蝮蛇蛇毒引起的出血有防护作用。结论用生物信息学方法成功获得尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列的6个关键抗原位点,针对这些位点设计合成的新型免疫原展示出初步免疫保护效果。

主 题 词：生物信息学 尖吻蝮蛇 蛇毒液类 表位 抗蛇毒素类 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3724/sp.j.1008.2010.00364

馆 藏 号：203625891...