灰盖鬼伞漆酶在毕赤酵母中表达及条件优化

作     者：裴佐蒂 彭日荷 田永生 赵伟 姚泉洪 PEI Zuo-di;PENG Ri-he;TIAN Yong-sheng;ZHAO Wei;YAO Quan-hong

作者机构：上海海洋大学水产与生命学院上海201306 上海市农业科学院生物技术研究所上海201106 

基　　金：上海市农委重点项目基金(No.2009-6-4和No.2011-1-8) 国际科学技术合作项目(2010DFA62320 11230705900) 国家自然科学基金(31071486) 

出 版 物：《上海农业学报》 (Acta Agriculturae Shanghai)

年 卷 期：2014年第30卷第4期

页      码：6-9页

摘      要：根据灰盖鬼伞漆酶基因LCC1的蛋白序列和毕赤酵母的密码子偏爱性设计并合成CCLCC1I基因片段,将其连接到经过改造的pPIC9K质粒上构建分泌表达载体pYN2395;构建好的载体经BglⅡ酶切线性化后电激转化到毕赤酵母GS115中,通过ABTS底物显色反应筛选获得阳性转化子。从培养基、发酵温度、铜离子浓度和甲醇添加量等方面对重组酵母的发酵条件进行了研究。结果显示:添加0.6%的丙氨酸能极大地提高灰盖鬼伞漆酶的表达量,并确定最终优化组合为:培养基使用MMA,发酵温度为20℃,铜离子体积浓度为0.5mmol/L,甲醇添加量为1.0%/24 h。

主 题 词：漆酶 毕赤酵母 灰盖鬼伞 表达优化 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-3924.2014.04.003

馆 藏 号：203628092...