猪伪狂犬病毒gD蛋白抗原表位的克隆及表达

作     者：刘芳 张冲 王寅彪 赵朴 邓瑞广 李学伍 LIU Fang;ZHANG Chong;WANG Yinbiao;ZHAO Pu;DENG Ruiguang;LI Xuewu

作者机构：河南科技大学动物科技学院河南洛阳471003 河南省农业科学院/河南省动物免疫学重点实验室河南郑州450002 

基　　金：国家自然科学基金项目(31172348) 

出 版 物：《河南农业科学》 (Journal of Henan Agricultural Sciences)

年 卷 期：2016年第45卷第4期

页      码：122-125页

摘      要：依据Gen Bank中猪伪狂犬病毒(PRV)BJ/YT株gD基因设计引物,扩增gD蛋白抗原表位,其设计扩增长度为702 bp,将扩增片段克隆到p MD19-T载体获得p MD19-T-gD。利用Bam HⅠ和HindⅢ限制性内切酶双酶切p MD19-T-gD质粒,进行琼脂糖凝胶电泳并回收酶切片段,将回收片段与原核表达载体p ET-28a连接,成功构建了p ET-28a-gD表达载体。将表达载体转化感受态细胞Rosetta,IPTG诱导表达后,进行SDS–PAGE电泳,结果显示,在25 ku处出现特异性蛋白质条带。Western blot分析结果表明,表达产物能够被PRV的阳性血清识别。综上,成功克隆并表达了gD蛋白抗原表位,且其表达产物具有较好的生物学活性。

主 题 词：猪伪狂犬病病毒 gD基因 抗原表位 蛋白质表达 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.15933/j.cnki.1004-3268.2016.04.027

馆 藏 号：203628679...