利用RNA干扰介导抗病性获得兼抗四种病毒的转基因马铃薯

作     者：齐恩芳 贾小霞 刘石 陈晓艳 文国宏 胡新元 Qi Enfang;Jia Xiaoxia;Liu Shi;Chen Xiaoyan;Wen Guohong;Hu Xinyuan

作者机构：甘肃省农业科学院马铃薯研究所兰州730070 哈密市伊州区种业研究开发中心新疆哈密839001 

基　　金：甘肃省农业科学院农业科技创新专项(2017GAAS39) 国家自然科学基金(31360353 31560412) 

出 版 物：《植物保护学报》 (Journal of Plant Protection)

年 卷 期：2019年第46卷第1期

页      码：192-200页

摘      要：为获得兼抗马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)、马铃薯卷叶病毒(Potato leaf roll virus,PLRV)和马铃薯潜隐花叶病毒(Potato virus S,PVS)4种病毒的转基因马铃薯新材料,分别以这4种病毒全长CP基因为模板,通过设计PCR引物和亚克隆获得4种病毒CP基因相对保守区段的基因片段,并将其拼接成融合基因,以载体pHANNIBAL和pBI121为基础,构建RNA干扰(RNA interference,RNAi)载体,利用农杆菌介导的转基因体系进行马铃薯遗传转化,并对获得的转基因马铃薯进行病毒抗性检测。结果表明,所获得的融合基因片段RH1和RH2,酶切鉴定分别得到长度为1 200 bp的条带,与预期片段相符;构建了含pdk内含子和RH1、RH2融合基因的RNAi植物表达载体,经Bam H I/Sac I双酶切,获得长度约3 200 bp的片段,表明RNAi植物表达载体pBI121-pRH构建成功;转化易感病毒马铃薯品种陇薯11号,PCR检测和PCRSouthern杂交分析表明融合基因已整合到陇薯11号马铃薯基因组中;抗病性检测显示4株转基因马铃薯植株对4种病毒均免疫。表明利用RNAi可筛选出抗多种病毒的转基因马铃薯新种质。

主 题 词：马铃薯病毒 RNA干扰 转基因马铃薯 多病毒抗性 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 090402[090402] 

核心收录：

D　O　I：10.13802/J.CNKI.ZWBHXB.2019.2017162

馆 藏 号：203629347...