利用CRISPR/Cas9系统构建Prdx6基因敲除的RAW264.7细胞系

作     者：翟菲菲 全芷仪 王路鹿 张士军 鞠丹迪 水一鸣 常江 常恒祯 胡盼 李岩松 卢士英 周玉 柳增善 李兆辉 任洪林 ZHAI Fei-fei;QUAN Zhi-yi;WANG Lu-lu;ZHANG Shi-jun;JU Dan-di;SHUI Yi-ming;CHANG Jiang;CHANG Heng-zhen;HU Pan;LI Yan-song;LU Shi-ying;ZHOU Yu;LIU Zeng-shan;LI Zhao-hui;REN Hong-lin

作者机构：吉林大学动物医学学院人兽共患病研究所/人兽共患病研究教育部重点实验室吉林长春130062 长春市实验中学吉林长春130000 

基　　金：国家重点研发计划项目(2018YFD0500900) 吉林省科技发展计划重点科技攻关项目(20170101149JC) 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2019年第40卷第4期

页      码：36-40页

摘      要：利用CRISPR/Cas9系统构建敲除Prdx6基因的RAW264.7小鼠巨噬细胞系,为探讨Prdx6与布鲁菌感染及胞内寄生的关系构建细胞模型。针对Prdx6基因的第1外显子设计sgRNA,构建重组表达载体Prdx6-pX459-sgRNA,将重组质粒转染RAW264.7细胞,嘌呤霉素初步筛选。单细胞接种并扩繁,提取基因组DNA,PCR及测序鉴定。结果表明,在敲除细胞株基因组中存在碱基缺失,导致移码突变。说明成功获得敲除Prdx6基因的RAW264.7细胞系。

主 题 词：CRISPR/Cas9 RAW264.7 Prdx6 移码突变 布鲁菌 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 090601[090601] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-5038.2019.04.007

馆 藏 号：203632793...