CRISPR-Cas9系统敲除亚麻FAD2基因表达载体的构建

作     者：张喻 江海霞 闫文亮 郭栋良 杨亮杰 叶佳丽 王玥 谢丽琼 Zhang Yu;Jiang Haixia;Yan Wenliang;Guo Dongliang;Yang Liangjie;Ye Jiali;Wang Yue;Xie Liqiong

作者机构：新疆大学生命科学与技术学院乌鲁木齐830046 

基　　金：高校科研计划项目(XJEDU2017M002) 国家自然科学基金(31160056 C020408) 新疆维吾尔自治区高技术项目(201517108)共同资助 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2019年第17卷第7期

页      码：2185-2192页

摘      要：CRISPR/Cas9系统是一种新型基因编辑工具,准确编辑目标基因,广泛应用于动植物的基因编辑中。本实验构建了油用亚麻品种‘陇亚10号’FAD2基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体,以CRISPR/Cas9基因编辑技术为切入点,根据Gene Bank中公布的FAD2基因序列(DQ222824.1)在FAD2基因外显子部分运用sg RNA在线设计软件CRISPR-P 2.0对亚麻FAD2基因做脱靶分析,在外显子区域选取2个片段作为靶序列进行敲除。以潮霉素作为筛选标记,采用Golden Gate cloning法构建针对‘陇亚10号’FAD2基因的CRISPR/Cas9基因敲除载体,命名为p YLCRISPR/Cas9-FAD2。将pYLCRISPR/Cas9-FAD2载体导入农杆菌并检测其稳定性,保存菌种以便后期利用农杆菌介导法转化‘陇亚10号’,为深入研究亚麻FAD2基因的功能提供参考。

主 题 词：亚麻 FAD2 CRISPR/Cas9 基因编辑 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

D　O　I：10.13271/j.mpb.017.002185

馆 藏 号：203633366...