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利用正交设计优化异色瓢虫SRAP-PCR反应体系

利用正交设计优化异色瓢虫SRAP-PCR反应体系

作     者:关桦楠 迟德富 宇佳 董婧 GUAN Hua-Nan;CHI De-Fu;YU Jia;DONG Jing

作者机构:东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040 

出 版 物:《昆虫知识》 (Entomological Knowledge)

年 卷 期:2008年第45卷第1期

页      码:156-161页

摘      要:利用正交设计L16(4^5)对异色瓢虫Harmonia axyridis(Pallas)SRAP-PCR反应体系的5个因素(Taq 酶、Mg^2+、模板DNA、dNTPs、引物)在4个水平上进行优化试验,试验结果用DIS和MINITAB软件进行分析,建立了异色瓢虫SRAP-PCR反应的最佳体系,即在20止体系中模板50—100ng、引物0.25μmol/L、dNTPs 0.1mmol/L、Taq DNA聚合酶1.5U、Mg^2+0.375~0.625mmol/L。并对反应体系进行梯度退火试验,得到最佳退火温度为50.3℃。这一优化系统的建立,为今后利用SRAP技术进行瓢虫遗传图谱的构建、多态性分析和基因定位奠定了技术基础。

主 题 词:异色瓢虫 SRAP 正交设计 分子标记 天敌昆虫 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 09[农学] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.0452-8255.2008.01.036

馆 藏 号:203633656...

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