产气荚膜梭菌实时荧光PCR方法的建立

作     者：石玉玲 曾兰兰 陈丽丹 李林海 孙朝晖 王露霞 SHI Yu-Ling;ZENG Lan-Lan;CHEN Li-Dan;LI Lin-Hai;SUN Zhao-Hui;WANG Lu-Xia

作者机构：广州军区广州总医院检验科广东广州510010 

基　　金：全军"十一五"医学科学技术研究专项(08Z009) 

出 版 物：《生物技术通讯》 (Letters in Biotechnology)

年 卷 期：2010年第21卷第3期

页      码：389-392页

摘      要：目的:利用荧光定量PCR技术,建立快速敏感特异的检测产气荚膜梭菌的方法。方法:以产气荚膜梭菌基因为靶序列设计引物和探针,以自产气荚膜梭菌菌株中提取的DNA为模板,优化引物和探针的浓度比,同时验证方法的特异性、敏感性。结果:建立的反应体系在上游引物浓度为0.45μmol/L、下游引物浓度为0.15μmol/L、探针浓度为0.3μmol/L时,具有良好的特异性和敏感性,与创伤弧菌等12种相关细菌均无交叉反应;对纯菌检测的灵敏度低于10 CFU/反应体系。结论:建立的实时荧光PCR方法特异、灵敏、快速,能对战时气性坏疽做出快速准确的报告,实现对这种战时高发疾病的安全、快速和定量检测。

主 题 词：产气荚膜梭菌 TaqMan探针 荧光定量PCR 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 071010[071010] 100705[100705] 081704[081704] 07[理学] 1001[医学-基础医学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1009-0002.2010.03.021

馆 藏 号：203634394...