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猪圆环病毒3型TaqMan-MGB荧光定量PCR方法的建立及应用

猪圆环病毒3型TaqMan-MGB荧光定量PCR方法的建立及应用

作     者:李晓菲 陈婷 孙爱荣 葛晓杰 黄艳 徐婷 王彩宏 魏笑笑 秦立廷 LI Xiao-fei;CHEN Ting;SUN Ai-rong;GE Xiao-jie;HUANG Yan;XU Ting;WANG Cai-hong;WEI Xiao-xiao;QIN Li-ting

作者机构:山东新希望六和集团有限公司山东青岛266000 

基  金:国家重点研发计划项目(2016YFD0501506) 国家重点研发计划项目(2017YFD0500600) 

出 版 物:《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期:2019年第41卷第2期

页      码:151-155页

摘      要:为建立猪圆环病毒3型(PCV3)荧光定量PCR检测方法,本研究根据GenBank中PCV3基因序列设计特异性引物和探针,经过反应体系和条件优化,建立了特异性检测PCV3的TaqMan-MGB荧光定量PCR方法。该检测方法在4.78×10~1拷贝/μL~4.78×10~9拷贝/μL质粒标准品范围内均有良好的线性关系;该方法特异性试验结果显示,其与多种常见猪病病毒均无交叉反应,特异性良好;本研究建立的方法敏感性是常规PCR方法的100倍,敏感性较高;批内批间重复性试验变异系数均小于2.3%,重复性良好。对临床样品的检测结果显示,该方法对PCV3的检出率高于常规PCR方法,并且PCV3阳性样品多存在混合感染情况。该方法的建立为PCV3的实验室诊断及流行病学调查提供了快速、准确的检测手段。

主 题 词:猪圆环病毒3型 TaqMan-MGB荧光定量方法 临床样品 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D O I:10.3969/j.issn.1008-0589.201805012

馆 藏 号:203635086...

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