猪δ冠状病毒TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR方法的建立和应用

作     者：李晓菲 陈婷 韩薇 孙爱荣 葛晓杰 梁文花 黄艳 王力 王彩宏 魏笑笑 秦立廷 LI Xiao-fei;CHEN Ting;HAN Wei;SUN Ai-rong;GE Xiao-jie;LIANG Wen-hua;HUANG Yan;WANG Li;WANG Cai-hong;WEI Xiao-xiao;QIN Li-ting

作者机构：山东新希望六和集团有限公司山东青岛266000 青岛市黄岛区动物疫病预防与控制中心山东青岛266400 

基　　金：国家重点研发计划项目(2017YFD0500600 2016YFD0501506) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2019年第49卷第4期

页      码：425-431页

摘      要：为了快速准确地检测猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV),本研究根据PDCoV基因序列保守区设计特异性引物和TaqMan-MGB探针,建立了一种特异性检测PDCoV的TaqMan-MGB荧光定量方法。结果显示,该方法特异性良好,对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒和猪圆环病毒2型等的检测结果均为阴性,无交叉反应;模板浓度在3.15×108～3.15×101copies/?L范围内具有良好的线性关系;敏感性高,最低检测限为10 copies/?L的模板;重复性好,批内和批间重复性试验变异系数分别为0.25%～1.06%和0.58%～1.27%;对临床样品的检测结果显示,本研究建立的荧光定量检测方法对PDCoV的阳性检出率(40%)高于常规PCR方法对PDCoV的阳性检出率(31.7%)。该方法的建立为PDCoV的实验室鉴别诊断及流行病学调查提供了快速、准确的检测手段。

主 题 词：猪δ冠状病毒 TaqMan-MGB探针 荧光定量方法 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0063

馆 藏 号：203635277...