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SARS-CoV基因重组质粒的构建与表达

SARS-CoV基因重组质粒的构建与表达

作     者:王英 王希良 曾政 田光 周华 赵光宇 石辛甫 罗德炎 

作者机构:军事医学科学院微生物流行病研究所免疫室北京100071 

出 版 物:《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)

年 卷 期:2004年第24卷第5期

页      码:397-399页

摘      要:目的 针对SARS冠状病毒 (SARS CoV)M、N、S和E蛋白 ,构建 4种重组真核表达质粒pVAX1 M、pVAX1 N、pVAX1 S和pVAX1 E ,为研制SARSDNA疫苗奠定基础。方法 根据GenBank中SARS病毒基因序列分别设计M、N、S和E引物 ,用RT PCR方法从感染SARS病毒的Vero E6细胞中扩增得到M、N、S和E片段 ,构建重组质粒pVAX1 M、pVAX1 N、pVAX1 S和pVAX1 E。并以重组质粒转染COS 7细胞 ,用免疫细胞化学和Westernblot方法鉴定重组质粒体外的表达。结果 经酶切鉴定及DNA序列测定证实重组质粒构建正确 ,细胞转染实验表明 ,构建的 4种重组质粒均能在COS 7细胞内表达。结论 成功构建 4种SARS CoV 4种蛋白抗原真核表达质粒 ,并能在真核细胞内获得表达。

主 题 词:SARS-CoV基因 基因重组质粒 SARS冠状病毒 SARS-CoV 菌种 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3760/j:issn:0254-5101.2004.05.023

馆 藏 号:203635344...

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