H7亚型禽流感病毒一步法RT-PCR检测方法的建立

作     者：包红梅 王秀荣 陶启蒙 蔡东东 王馥梅 陈化兰 Hongmei Bao;Xiurong Wang;Qimeng Tao;Dongdong Cai;Fumei Wang;Hualan Chen

作者机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室侬业部动物流感重点开放实验室哈尔滨150001 

基　　金：防禽流感高效生物制剂试生产开发项目(No.2007DFR30360)资助 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2009年第25卷第11期

页      码：1658-1663页

摘      要：通过分析流感数据库45个H7亚型禽流感病毒的HA序列,在保守区内设计并合成引物,建立了一步法RT-PCR检测方法,扩增片段大小为501bp。通过对H7亚型禽流感病毒尿囊液和棉拭子浸出液不同滴度检测,证实病毒尿囊液最低检出量为105.5EID50/mL;阳性棉拭子最低检出量为103EID50/mL。用该方法检测H1～H15亚型禽流感病毒和鸡新城疫病毒等其他14种禽病病原进行检测,仅有H7亚型AIV有特异性目的条带,与其他均无交叉反应。从脏器及咽喉、泄殖腔棉拭子样品的病毒分离和RT-PCR方法比较,表明在10-1的样品浓度下,两者可以达到相同的检出量。表明该一步法RT-PCR方法具有特异性强、敏感性高和准确率高的特点。

主 题 词：禽流感病毒 反转录聚合酶链反应 H7N1 亚型鉴别 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1000-3061.2009.11.010

馆 藏 号：203641171...