反转录-环介导等温扩增技术快速检测志贺氏菌

作     者：丁梦璇 刘秀 刘伯扬 梁玉林 周振森 尹建军 宋全厚 DING Mengxuan;LIU Xiu;LIU Boyang;LIANG Yulin;ZHOU Zhensen;YIN Jianjun;SONG Quanhou

作者机构：中国食品发酵工业研究院有限公司北京100015 内蒙古蒙牛乳业(集团)股份有限公司质量安全管理系统中心实验室内蒙古呼和浩特011517 

出 版 物：《食品与发酵工业》 (Food and Fermentation Industries)

年 卷 期：2019年第45卷第4期

页      码：193-199页

摘      要：建立了反转录-环介导等温扩增技术的志贺氏菌快速检测方法。针对志贺氏菌特异保守基因ipa H设计多套引物,建立优化了的反应体系,并评价其准确性、特异性、灵敏度。以人工污染脱脂乳样品比较RT-LAMP与RT-PCR的灵敏度。结果表明,在65℃等温条件下,RT-LAMP反应可在30 min内完成。在活菌/损伤菌模型中,该方法表现出比国标法更好的准确性。在23株细菌标准菌株中仅对4株志贺氏菌有特异性检出。志贺氏菌RNA模板的检测灵敏度为7 fg/μL。人工污染脱脂乳样品检测灵敏度达到40 CFU/g,比RT-PCR方法高出2个数量级。表明所建立的志贺氏菌RT-LAMP扩增方法可以准确的检测志贺氏菌,同时具有快速、特异、灵敏的优势,可用于志贺氏菌的快速筛查和现场监控。

主 题 词：反转录环介导等温扩增 志贺氏菌 ipaH基因 快速检测 

学科分类：09[农学] 0903[农学-动物生产类] 

核心收录：

D　O　I：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.018815

馆 藏 号：203641193...