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伴放线放线杆菌cdtC基因的克隆及其原核表达载体pET15b-cdtC的构建

伴放线放线杆菌cdtC基因的克隆及其原核表达载体pET15b-cdtC的构建

作     者:王晓茜 李璐 徐艳 

作者机构:南京医科大学口腔医学研究所江苏南京210029 南京医科大学附属口腔医院牙周科 

基  金:国家自然科学基金项目(编号:30700942) 江苏省高校自然科学基础研究面上项目(编号:07KJB320076) 教育部留学回国人员启动基金项目 

出 版 物:《口腔医学研究》 (Journal of Oral Science Research)

年 卷 期:2010年第26卷第2期

页      码:153-156页

摘      要:目的:本实验设计克隆Aa CdtC亚基蛋白的编码基因cdtC并构建其原核表达载体pET 15b-cdtC,为研究CdtC亚基对CDT全毒素功能的分子机制奠定基础。方法:厌氧培养Aa ATCC 29523,提取Aa基因组DNA,PCR反应扩增cdtC基因片段。将此片段克隆入pMD 19-T Vector,经限制性内切酶BamHI和Xho I酶切得到粘性末端cdtC片段,克隆入原核表达载体pET 15b中。结果:产物经PCR初步鉴定后进行DNA序列分析,测序结果与Genbank公布序列一致性达100%。结论:本实验成功克隆了cdtC基因,并成功构建了其原核表达载体pET15b-cdtC。为深入研究CdtC亚基以及CDT全毒素分子作用机制奠定基础。

主 题 词:伴放线放线杆菌 基因克隆 cdtC 原核表达载体 

学科分类:1003[医学-口腔医学类] 100302[100302] 10[医学] 

D O I:10.13701/j.cnki.kqyxyj.2010.02.043

馆 藏 号:203641333...

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