PDCD4基因小干扰RNA的筛选及其对人白血病细胞药物敏感性的研究

作     者：谷景义 朱雪娇 费嘉 GU Jing-yi;ZHU Xue-jiao;FEI Jia

作者机构：暨南大学医学院生物化学与分子生物学教研室广东广州510632 暨南大学医学院中心实验室广东广州510632 

基　　金：国家自然科学基金项目(81170496) 暨南大学科研培育与创新基金项目(21609406) 

出 版 物：《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 (Journal of Jinan University(Natural Science & Medicine Edition))

年 卷 期：2012年第33卷第6期

页      码：553-558页

摘      要：目的:筛选出PDCD4 siRNA的有效序列,并研究其对白血病K562细胞药物敏感性的影响。方法:利用生物信息学的方法设计并合成3条PDCD4 siRNA候选序列,将PDCD4 siRNA候选序列分别转染K562细胞,用实时定量RT-PCR的方法(Real-time RT-PCR)筛选出能有效沉默PDCD4基因mRNA表达的序列,并用蛋白印迹法(Western blotting)检测该有效序列对细胞内PDCD4蛋白表达水平的影响。将有效序列转染k562细胞6 h后,分别与常用的抗白血病药物三氧化二砷(As2O3)、阿糖胞苷(Ara-c)、小檗碱(BB)联合作用72 h,用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测PDCD4 siRNA对细胞药物敏感性的影响。结果:用实时定量PCR成功筛选出一条有效干扰PDCD4mRNA表达的序列,用Western blotting法检测该序列可显著降低PDCD4蛋白的表达水平(P<0.05);与ATO,Ara-c,BB联合作用72 h后,PDCD4表达的下调降低了细胞的药物敏感性(P<0.05)。结论:沉默PDCD4能够显著降低白血病细胞的药物敏感性,PDCD4 siRNA能够显著挽救药物作用后的细胞活性。

主 题 词：PDCD4 siRNA 白血病K562细胞 三氧化二砷 阿糖胞苷 小檗碱 药物敏感性 

学科分类：1006[医学-中西医结合类] 100602[100602] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-9965.2012.06.002

馆 藏 号：203642581...